Fish IF共染原位杂交原理：原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上▨进行。IF即免疫荧光，可检测组织或细胞中某蛋白的表达情况及定位。

原位交配(FISH、IF双标)需要探测靶表观遗传与靶淀粉酶的共精准定位情况发生。

Fish IF共染实验步骤

1、团队安排稳定：团队安排取掉清洗后立马倒入稳定液(DEPC水标定)中稳定2-12h。2、脱干：组织性统一进行后经系数乙醇脱干后浸蜡，包埋。3、切块：石蜡经切块机切块，摊片机捞片，62°烤箱烤片2h。4、石蜡切开脱蜡至水：顺次将切开加入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水甲醇Ⅰ5min-无水甲醇Ⅱ5min-85%朗姆酒5min-75%朗姆酒5min-DEPC机洗。5、吸收：表明团体比较固定时光厚薄，薄片于清理液中烧沸10-14多分钟，肯定冷却水。后人类基因笔划圈，表明差异团体差异统计指标属性，滴入淀粉酶酶K(20ug/ml) 37°吸收20-30min。蒸馏水清洗阴道后PBS洗3次×5min。6、预混种改良品种：加入适量预混种改良品种液，37°C孵育1h。7、交配：倾去预交配液，中滴加含电极交配液,恒温器箱37度交配一晚。8、改良品种后清洗：洗去改良品种液，2×SSC，37°C 洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC在常温洗10min。只恨特异改良品种体较多，行曾加甲酰胺清洗。9、孵育一抗：中滴加一抗，PBS配制。4°住宿。后PBS洗3×5min。10、孵育二抗：加入适量根据二抗，空调温度孵育50min。后PBS洗3×5min。11、DAPI复染核：薄片滴入DAPI染液，阴凉孵育8min，消毒后滴入抗荧光淬灭封颗粒剂封片。12.镜检照摄：切开于尼康正置荧光体视显微镜下查看并抓取数字图像。(UV紫外线调动起光谱330-380nm，放出光谱420nm,发蓝光;FAM(488)绿光调动起光谱465-495nm，放出光谱515-555 nm，发绿光;CY3红光调动起光谱510-560，放出光谱590nm，泛白光。)送样货运请求：冰切。组织薄片放原位杂交育种不变液中，常温下运送;冻冰薄片-20°运送。石蜡。动物标本放原位杂交种比较固定液中，干燥状态公路运载;石蜡组织切片干燥状态公路运载。组织肿瘤细胞爬片。组织肿瘤细胞爬片加原位有性杂交确定液确定15min后，良好的密封性，4度搬运。共瞄准皿丰富度企业：企业导出来后能马上速冻加工，后干冰及运输到北京确定后面冷藏切成片加工。丰富度企业-80°维持。

毓秀海洋动物社会（沪）非常有限品牌不是家专心致志于海洋动物社会领先技術工艺科研项目管理和科技课题技術工艺精准服务项目的品𝓀牌，品牌岩土工程师正规专业的原子核结构海洋动物学、肿瘤神经细胞海洋动物学、结构病症报告学检测室，为非常多海洋动物医疗各个企业、科技课题贷款机构、医院医生及高等院校打造原子核结构海洋动物学、肿瘤神经细胞海洋动物学、病症报告特征学等领域科技课题精准服务项目。品牌本质团对曾在꧒全国外一些杰出高等学府专业对口过多时年科研项目管理工作的，积极践行“为客户创造价值，为员工实现梦想，为社会创造财富"的经营理念，坚持以技术创新为先导，以服务质量为根本，为中国生物医药和科学研究提供优质的产品和技术服务。